真菌格莫瑞六亚甲基四胺（Gomori’s Methenamine Silver；GMS）银染试剂盒-原理性说明书参考

HEPENGBIO真菌格莫瑞六亚甲基四胺（Gomori's Methenamine Silver；HEPENGBIO）银染试剂盒
产品说明书（中文版）
 
主要用途
 
HEPENGBIO真菌格莫瑞六亚甲基四胺（Gomori's Methenamine Silver；HEPENGBIO）银染试剂是一种旨在使用银离子的醛基还原反应技术，识别各种涂片或存档中的石蜡包埋组织切片中棕黑色染色的真菌细胞的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统格莫瑞（Gomori）方法、成功实验证明的。广泛用于各种真菌菌株（例如aspergillosis和pneumocystis）的染色等。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。
 
技术背景
 
真菌的细胞壁含有粘多糖（mucopolyssachride）成分，氧化后，释放出醛基（aldehyde group），与银离子反应，使银离子还原为黑色金属银，产生金黄色的背景下，棕黑色的真菌细胞。  
 
产品内容
 
HEPENGBIO清理液（Reagent A）  毫升
HEPENGBIO固着液（Reagent B）  毫升
HEPENGBIO氧化液（Reagent C）  毫升
HEPENGBIO强化液（Reagent D）     毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent E）       毫升
HEPENGBIO置换液（Reagent F）  毫升
HEPENGBIO稳定液（Reagent G）  毫升
产品说明书  1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO染色液（Reagent E）避免光照；HEPENGBIO氧化液（Reagent C）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证3月
 
用户自备
 
恒温培养箱或恒温水槽：用于样品反应孵育
盖玻片：用于切片封片
中性树脂：用于切片封片
光学显微镜：用于切片染色后观察分析
 
 
 
实验步骤
 
1． 准备好真菌涂片或4微米厚的石蜡切片脱蜡处理
2． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
4． 小心加上xx微升HEPENGBIO固着液（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面
5． 室温下孵育15分钟
6． 小心移去切片上的HEPENGBIO固着液（Reagent B）
7． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
8． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
9． 小心加上xx微升HEPENGBIO氧化液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面
10． 室温下孵育60分钟
11． 小心移去切片上的HEPENGBIO氧化液（Reagent C）
12． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
13． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
14． 重复实验步骤12至13二次
15． 小心加上xx微升HEPENGBIO强化液（Reagent D）在切片上，铺满整个切片样品表面
16． 室温下孵育1分钟
17． 小心移去切片上的HEPENGBIO强化液（Reagent D）
18． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
19． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
20． 重复实验步骤18至19二次
21． 小心加入xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent E）在切片上，铺满整个切片样品表面
22． 放进50℃恒温培养箱孵育60分钟，或直至出现棕色（注意：避免干枯）
23． 小心移去HEPENGBIO染色液（Reagent E）
24． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
25． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
26． 重复实验步骤24至25二次
27． 小心加上xx微升HEPENGBIO置换液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
28． 室温下孵育1分钟，或直至出现灰色
29． 小心移去切片上的HEPENGBIO置换液（Reagent F）
30． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
31． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
32． 重复实验步骤30至31二次
33． 小心加入xx微升HEPENGBIO稳定液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面
34． 室温下孵育3分钟 
35． 小心移去HEPENGBIO稳定液（Reagent G）
36． 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
37． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
38． 重复实验步骤36至37一次
39． （选择步骤）复染处理 （建议使用HEPENGBIO淡绿（LIGHT GREEN）复染试剂盒——HEPENGBIO80091）
40． 即刻放上盖玻片或封片（中性树脂）
41． 在一般光学显微镜下观察：
 
注意事项
 
1． 本产品为50次操作
2． 操作时，须戴手套
3． HEPENGBIO氧化液（Reagent D）具有腐蚀性，注意操作安全
4． HEPENGBIO氧化液（Reagent D）出现明显棕色，须更换后使用
5． 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干
6． 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面
7． 整个操作，在避光状态下进行
8． 染色完成后，即刻进行光学显微镜观察 
9． 样品染色后保存，避免光照
10． 染色容易过度，注意观察背景颜色，控制操作时间
11． 本公司提供系列微生物染色试剂产品